非洲豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒

批準文號：疫控診【2021】92號

     

獸用

 

本試劑盒是用提純的非洲豬瘟病毒p72蛋白和針對p72蛋白的單克隆抗體建立的阻斷ELISA抗體檢測方法，用于檢測非洲豬瘟病毒抗體。

[通用名稱] 非洲豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒

商品名稱：無

[英文名稱] Blocking ELISA Kit For African Swine Fever Virus Antibodies

[漢語拼音] Feizhouzhuwen Bingdu Zuduan ELISA Kangti Jiance Shijihe

[主要成分與含量] 

[作用與用途] 

用于檢測非洲豬瘟病毒抗體。

[用法與判定]

1  試劑準備

（1）平衡  使用前將試劑盒平衡至20~25℃，液體試劑使用前輕輕旋轉或振蕩

混勻。

（2）洗滌工作液配制  將濃縮洗滌液（20×）用純化水20倍稀釋后備用。

2  操作步驟

（1）加樣  在抗原包被板（ASFV）各孔中加入50μl樣本稀釋液（ASFV），再

在相應孔中加入50μl陰性對照（ASFV）、陽性對照（ASFV）、待檢樣本，

振蕩混勻。每塊板可檢測樣本92份，設陽性對照2孔、陰性對照2孔。

（2）孵育  貼緊封板膜，置37℃恒溫培養箱內孵育60分鐘。

（3）洗板  揭掉封板膜，將各孔的液體棄入廢液桶，每孔加入約300μl洗滌工作

液，浸泡約10秒，棄去廢液，連續洗滌4次。在最后一次棄去廢液后，將孔

中殘留的洗滌廢液在吸水紙上拍干。

（4）加單抗酶結合物  每孔加入100μl單抗酶結合物（ASFV）。

（5）孵育  貼緊封板膜，置37℃恒溫培養箱內孵育30分鐘。

（6）洗板  重復（3）。

（7）顯色  每孔加入100μl TMB底物液，置20~25℃避光孵育15分鐘。

（8）終止  每孔加入50μl終止液。

（9）測定  酶標儀上讀取并且記錄樣本和對照的OD值（主波長使用450nm，推

薦使用輔助波長為630nm）。

3  判定

（1）成立條件  當2孔陰性對照OD平均值＞1.0，且陽性對照OD平均值/陰性對照

OD平均值＜0.4時，試驗成立，否則試驗不成立。

（2）S/N值的計算公式  S/N值=待檢樣本OD值/陰性對照OD平均值，其中S代表待

檢樣本OD值，N代表陰性對照OD平均值，計算S/N值：

如果S/N值≥0.6，樣本應判定為抗體陰性；

如果S/N值≤0.5，樣本應判定為抗體陽性；

如果0.5＜S/N值＜0.6，樣本應判定為可疑樣本。

可疑樣本應重檢，重檢結果為陽性或可疑者，該樣本應判定陽性；重檢結果為陰性者，該樣本應判定為陰性。 

[注意事項]

（1）嚴格按照試劑盒的“用法與判定”進行操作。

（2）本品僅用于檢測非洲豬瘟病毒抗體，試劑盒中的組分不可作他用。

（3）使用前應將試劑盒恢復至20~25℃，避免陽光直射。

（4）試劑盒必須在2~8℃保存，未使用完的抗原包被板（ASFV）及各試劑應盡快放入2~8℃保存。

（5）實驗所用移液器、溫箱等設備應定期校準。

（6）終止液應避免與皮膚直接接觸。

（7）實驗廢棄物應按照相關管理規定妥善處理。

[規格]

96孔/板×1板/盒、96孔/板×2板/盒、96孔/板×5板/盒

[貯藏與有效期]

2~8℃保存，有效期暫定為18個月。

 

僅供獸醫診斷使用

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